一、目的
學會植物組織中粗脂肪含量的測定方法。
二、材料用具及儀器藥品
花生種子、大豆種子、索氏脂肪抽提器、電熱恒溫水浴鍋、電吹風、濾紙、稱量瓶、電子天平、20~40目篩、小粉碎機、無水乙mi(A.R.).
索氏提取器脂肪測定儀之粗脂肪的定量測定(油重法)
三、原理
脂肪不溶于水,易溶于有機溶劑,用乙mi或石油醚可將脂肪類物質提取出來。提取物中除脂肪外,還有游離脂肪酸、石蠟、磷酯、固醇、色素、有機酸等物質,總稱“粗脂肪",粗脂肪的定量分析常用油重法。
四、實驗步驟
1.樣品制備:含油種子去殼去雜,在105℃烘箱烘干1小時,用磨碎機粉碎,過20或40目篩,裝瓶備用。
2.將洗凈的索氏抽提器小燒瓶編號,置105℃烘箱中烘2小時,取出,置干燥器內(nèi)冷卻至室溫,用天平稱重,并記錄(W2)。
3.精密稱取待測樣品2g(A),裝入過濾紙筒(或包),在試樣面層塞以脫脂棉,以防漏散,將濾紙筒(包)放入提取管內(nèi)。
4.已稱重的小燒瓶內(nèi),倒入1/2~2/3體積的無水乙mi,聯(lián)接索氏提取器各部分 ,在水浴上進行抽提??刂扑囟?0~80℃,以每小時回餾3~5次較宜,一般抽提8~10小時,含油量較高的可適當增加抽提時間。
5.抽提完畢,使乙mi流入小燒瓶時,取出濾紙筒(包),再回餾一次以洗滌抽提管。繼續(xù)蒸餾,待抽提管內(nèi)乙mi液面接近虹吸管上端而未流入小燒瓶前,倒出抽提管中乙mi。如此進行數(shù)次,直至小燒瓶中乙mi基本蒸盡,取下小燒瓶,用吹風機使殘留的乙mi全部揮發(fā)。
6.將裝有脂肪的小燒瓶置于105℃烘箱中烘1小時,取出置干燥器中冷至室溫,稱重。再烘半小時,取出冷卻,再稱重,直至恒重(W1);根據(jù)小燒瓶增加之重量,即可計算出樣品的粗脂肪含量。